Koronavirus sindroma akutne dijareje svinja (SADS-CoV) je novootkriveni svinjski enterički patogeni korona virus koji može uzrokovati vodenastu dijareju kod novorođenčadi i uzrokovati značajne ekonomske gubitke u industriji svinja.Trenutno ne postoji odgovarajuća serološka metoda za procjenu efikasnosti SADS-CoV infekcije i vakcine, tako da postoji hitna potreba za korištenjem efikasnog enzimskog imunosorbentnog testa (ELISA) kako bi se nadoknadio ovaj nedostatak.Ovdje je konstruiran rekombinantni plazmid koji eksprimira SADS-CoV spike (S) protein fuzioniran sa ljudskim IgG Fc domenom da proizvodi rekombinantni bakulovirus i eksprimiran u HEK 293F ćelijama.S-Fc protein se pročišćava smolom proteina G i zadržava reaktivnost sa anti-humanim Fc i anti-SADS-CoV antitelima.Zatim je S-Fc protein korišten za razvoj indirektne ELISA (S-iELISA) i optimizaciju uvjeta reakcije S-iELISA.Kao rezultat toga, analizom vrijednosti OD450nm 40 SADS-CoV negativnih seruma potvrđenih imunofluorescentnim testom (IFA) i Western blottingom, utvrđena je granična vrijednost 0,3711.Koeficijent varijacije (CV) 6 SADS-CoV pozitivnih seruma unutar i između serija S-iELISA bio je manji od 10%.Test unakrsne reaktivnosti pokazao je da S-iELISA nema unakrsnu reaktivnost s drugim serumima virusa svinja.Osim toga, na osnovu detekcije 111 kliničkih uzoraka seruma, ukupna stopa podudarnosti IFA i S-iELISA bila je 97,3%.Test neutralizacije virusa sa 7 različitih OD450nm vrijednosti seruma pokazao je da je vrijednost OD450nm otkrivena pomoću S-iELISA pozitivno korelirana s testom neutralizacije virusa.Konačno, S-iELISA je urađena na 300 uzoraka seruma farme svinja.Komercijalni kompleti drugih svinjskih enterovirusa pokazali su da su IgG pozitivne stope SADS-CoV, TGEV, PDCoV i PEDV bile 81,7%, 54% i 65,3%, respektivno., 6%, respektivno.Rezultati pokazuju da je S-iELISA specifičan, osjetljiv i reproduktivan i da se može koristiti za otkrivanje infekcije SADS-CoV u industriji svinja.Ovaj članak je zaštićen autorskim pravima.sva prava zadržana.
Vrijeme objave: Jun-22-2021